第六篇:兽医微生物学与免疫学
一:细菌的结构与生理
1.细菌形态：具有细胞壁和核质的单细胞原核细胞型微生物。无成形的细胞核，无完整的细胞器。以微米为测量单位。在固体培养基上培养，肉眼可见菌体集落。
2.细菌结构
（一）细胞壁：G-菌1.肽聚糖：为聚糖骨架；原核生物细胞特有。
2.磷壁酸：G+菌特有；其抗原性较强：黏附宿主细胞。
G-菌：1.肽聚糖：（少量）
2.外膜：外膜蛋白：脂蛋白.微孔蛋白。
脂质双层：
脂多糖：类脂A：内毒素成分。
核心多糖：具有属特异性。
特异性多糖：具有种.型特异性。
3.周浆间隙：外膜与细胞膜之间,可获得营养,解除病毒。
（二)细胞膜：定义：为脂质双层,并镶嵌有特殊功能的载体蛋白酶类；不含胆固醇。
功能：物质交换.分泌胞外酶.产生与利用能量有关.细胞生物合成的场所。
（三）细胞质：成分：水.蛋白质.脂类.核酸.少量无机盐.核糖体.质粒。(为超微结构)
核糖体：由RNA和蛋白质组成；是蛋白质合成场所。
质粒：定义：细胞染色体外的遗传物质,为双股DNA分子。
包括：F质粒：决定细菌的致育性。
R质粒：决定耐药性。
毒力质粒：决定致病性。
(四)核体：染色体(裸露的双链DNA)
3.G+菌：革兰氏染色为紫色；
G-菌：革兰氏染色为红色。
4.细胞壁的功能：维持固有形态.物质交换.携带有抗原决定簇与致病性有关。
5.细菌特殊结构：
⑴荚膜：①为黏液样物质；②为多糖或多肽或透明质酸奶；③在营养品丰富时才形成；④能抵抗吞噬；⑤有特异性抗氧。
⑵鞭毛：①细长波浪状物业；②成分为蛋白质；③能运行(沙门菌)；④有特异的H抗氧;⑤与黏附有关。
⑶菌毛：①普通菌毛：有黏附功能的；②性菌毛：F菌毛。
成分为pro；有良好的呓抗原性。
⑷芽孢：定义：一定条件下胞质脱水浓缩形成；有多层膜包裹；通透性低；有完整核质和酶系统；代谢静止；不能分裂繁殖。是抵抗不良环境的特殊形成。
灭活方法：℃干热灭菌或高压蒸气灭菌
6.细菌染色方法
①革兰氏染色法的程序：草酸铵结晶紫染色1min→碘液染1min→95％醇脱色30s→碳酸复红1min.
意义：鉴别细菌.选择抗菌药物。
②瑞氏染色法：将细菌染成蓝色；组织细胞的细胞核染成蓝色；背景和细胞浆染成红色。
③抗酸染色法：常用于结核杆菌.副结核杆菌的染色(红色)。
顺序是：碳酸复红微热3－5min→3％盐酸酒精脱色→碱性美兰复红1min.
④特殊染色法：包括抗酸染色法.芽孢／荚膜／鞭毛染色法。
7.细菌的生长条件：①营养物质；②酸碱度(最宜pH为7.2-7.6)；③温度(最适为3％)；④气体(氧气.二氧化碳)；⑤渗透性。
8.世代时间：一个菌体以二分裂方式繁殖为两个菌体所需的时间。
9.细菌的生长曲线分为四个时期：
①迟缓期：菌体增大,代谢活跃；分裂迟缓,细菌数增加不显著。
②对数期：活菌数对数直线上升；生物活性典型；对抗生素敏感。
③稳定期：新繁殖的活菌数与死菌数平衡；产生芽孢,外毒素等。
④衰亡期：死菌数超过活菌数；菌体形态改变。
10.细菌新成代谢的能量由ATP供给。
11.细菌生物氧化的类型
①发酵：以有机物为受氢体。
②有氧呼吸：以氧气为受氢体。
③厌氧呼吸：以无机物硝酸盐为受氢体。
12.细菌合成的代谢产物：
①致热源：(操作时严格注意无菌操作)。
②毒素：内毒素为G-菌死后释放,外毒素为G+菌分泌的蛋白质。
③侵袭性酶类：透明质酸酶(促使细菌扩散)。
④色素：铜绿假单胞菌产绿色色素。
⑤细菌素：仅对近缘菌株有抗菌作用的蛋白质,如：绿脓菌素。
⑥抗生素：多有放线菌和真菌产生。
⑦维生素：大肠杆菌能合成维生素B维生素K。
13.细菌的分解代谢试验：
①氧化发酵试验：大肠杆菌产酸产气；沙门菌产酸不产气。
②氧化酶试验：阳性者为什么紫色。(阳性菌有假单胞菌.气单胞菌；阴性菌有：肠科杆菌)
③过氧化氢酶试验：阳性者产生气泡。(阳性：葡萄球菌.微球菌。阴性：链球菌。)
④硫化氢试验：产生黑色为阳性(阳性：变形杆菌；阴性：大肠杆菌)
⑤尿素酶试验：阳性者呈红紫色(阳性：变形杆菌；阴性：沙门菌)
⑥吲哚试验：阳性呈红色(阳性：大肝杆菌.变形杆菌)
⑦甲基红试验(MR)：红色反应为阳性(阳性：大肠杆；阴性：产气杆)
⑧VP试验：阳性呈红色(阳性：产气杆菌;阴性：大肠杆菌)
⑨枸橼酸盐利用试验(C):培养基变深兰为阳性(阳性：产气杆菌；阴性：大肠杆菌)
⑩IMVC试验：大肠杆菌++--;产气杆菌--++
14.固体培养基中琼脂含义2％；半固体培养基中琼脂含量0.5%。
15.基础培养基：常用普通肉汤培养基,含蛋白胨.牛肉浸膏.NaCl.水等；常用于糖发酵试验。
16.营养培养基：在基础培养基中加入葡萄糖.血液.血清.酵母浸膏等；常用血琼脂平板(链球菌)。
17.选择培养基：麦康凯培养基抑制G+生长,利于用大肠杆菌.沙门菌生长。
18.鉴别培养基：另加入底物及指示剂,而鉴别细菌。
19.厌氧培养基：常用疱肉培养基；即在肉浸液中加入煮过的肉渣,用凡士林封口。
20.液体培养基生长现象：①混浊生长(葡萄球菌)；②沉淀生长(链球菌)；③菌膜生长(枯草杆菌)。
21.半固体培养基中的生长现象：沿穿刺线生长或穿刺线向四周扩散呈放射状生长。
22.固体培养基中的生长现象：平板上划线后形成菌落；斜面上划线重叠形成菌苔。
二．细菌的感染
1.正常菌体的分布：
①口腔：球菌.乳杆菌.棒状杆菌；
②胃：乳杆菌.幽门螺杆菌；
③反刍前胃：无芽孢厌氧菌；
④大肠：双歧,拟杆菌,肠球菌,大肠杆菌,乳杆菌；
⑤鼻.咽：葡萄酒球菌；
⑥喉.扁桃体：甲型链球菌,卡他球菌；
⑦阴道：乳杆菌；
⑧尿道口：葡萄球菌,棒状杆菌；
⑨支气管.肺：无菌；
2.正常菌群的生理作用：生物颉颃作用,营养作用,免疫作用。
3.柯赫法则：是确定某种细菌是否有具有致病性的主要依据。
①特定的病原菌应在同一疾病中可见,在健康者不存在；
②此病原菌能被分离培养而得到纯种；
③此病原菌纯培养物接种易感动物能导致同样病症；
④自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养物。
4.细菌的毒力因子：
⑴侵袭力
黏附因子
F1菌毛：无特异性；
F4菌毛K88：黏附猪小肠前段；
F6菌毛P：黏附猪小肠后段。
侵袭性酶
透明质酸酶.链激酶：链球菌产生;
胶原酶：梭菌,气单胞菌产生;
血液凝固酶：致病葡萄菌产生。
Ⅱ型分泌系统
沙门氏菌.大肠杆菌等具有。
干扰防御
荚膜：抵抗吞噬；
细菌表面蛋白：抗吞噬.避免抗体补体作用；
蛋白酶：
细胞内逃逸：如产生过氧化氢,中和吞噬细胞中的氧自由基。
⑵毒素
外毒素
由G+及少量G-(如产毒性大肠埃希氏菌)产生；
0.3%甲醛刺激
外毒素→→→→类毒素→→→产生抗毒素；
机体
神经毒素：包括破伤风毒素,肉毒毒素。
内毒素
是G-菌细胞壁的脂多糖,当细菌死亡后才游离出来；
产生症状：发热.毒血症.休克.内凝血.出血。
5.破伤风梭菌及其芽孢必须侵入缺氧的深部创口才能致病。
6.①菌血症：病原菌侵入血统,但不繁殖。
②毒血症：病原菌不的入血,但其产生内毒素入血,引起症状。
③败血症:病原菌入血,并繁殖产生毒性物质,引起中毒症状(高热.皮肤黏膜淤斑.肝脾肿大)。
④脓毒血症：化脓性细菌入血并繁殖,产生新的化脓灶。
7.药敏试验结果判定标准：
①敏感：用常用剂量时,该抗菌药物治疗有效。
②中介：指被测菌株的MIC与该抗菌药物常用剂量所能达到的血清和组织浓度相近。
③耐药：指被测菌株不能被该抗菌药物常用剂量达到的血液浓度所抑制,临床治疗无效。
三．细菌感染的诊断
1.采集样本的原则：
①严格无菌操作；
②根据不同疾病或同一疾病不同时期采集不同的标本；
③应在使用抗菌药前采集,且采集时不得使用消毒剂；
④样本须新鲜,尽快送检；
多数可冷藏运输,粪便样本常加入甘油缓冲盐水保存液；
按规定包装.冷藏.专人递送；
做好标记。
2.抗体检测：最好检测急性期和恢复双份血清样本,后者为前者4倍以上才具诊断价值。
3.聚合酶链式反应(PCR)的4种主要材料：DNA模板.引物.耐热DNA聚合酶.脱氧核苷酸。
4.核酸杂交技术的设计原理：DNA双螺旋分子的碱基互补原理。
5.利用生化反应对肠道杆菌进行鉴定是必不可少的。
四．消毒与灭菌
1.消毒：指杀灭病原微生物,但不一定能杀死芽孢。
2.灭菌：指杀灭病原微生物.非病原微生物及其芽孢。
3.高压蒸汽灭菌法：应用最广.灭菌效果最好的方法。其条件为什么.4
kp..3℃.维持15-30min.
4.煮沸法：℃时5min可杀死细菌的繁殖体,1-3h杀死芽孢,加入2%碳酸钠则沸点升至少℃
5.流通蒸汽法：℃30min杀死细菌的繁殖体,不可杀死芽孢。
6.巴氏消毒法：主要用于食品消毒,如下65℃维持30min.
7.热空气灭菌法：℃,2h可杀死芽孢。用于玻璃器皿消毒。
8.紫外线灭菌：nm波长的紫外线杀菌能力最强。用于实验室,养殖场入口的消毒室.手术室.种蛋等的空气消毒。
9.电离辐射灭菌：称“冷灭菌”,用于一次性医用塑料制品消毒。
10.滤过除菌法：所器具为滤菌器,其孔径为0.22-0.45um即细菌不能通过,但病毒.支原体可通过。
11.紫外线消毒：有效距离不超过2-3m.
12.消毒剂作用机制：①使菌体蛋白变性.凝固(醇.酚.醛)；②干扰细菌代谢(酚类)；③改变细胞膜通透性(新洁尔灭)。
13.能杀灭芽孢的消毒剂：氯制剂.过氧化化物.醛类。
14.影响消毒药作用的因素：①浓度.性质.作用时间；②温度和酸碱度；③细菌种类.数量状态；④有机物。
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未完待续......
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